金剛烷胺

金剛烷胺早是用于抑制A型流感病毒的藥物。在20世紀(jì)90年代末，曾用于動(dòng)物病毒的預(yù)防和治療。但長(zhǎng)期使用金剛烷胺會(huì)使動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生一定的毒性，這些毒素終會(huì)累積在人體內(nèi)，從而危害人的身體健康。金剛烷胺在動(dòng)物性食品中殘留量的檢測(cè)也是今年國(guó)家食品安全監(jiān)督抽檢中的一個(gè)重要檢測(cè)項(xiàng)目。

安譜實(shí)驗(yàn)根據(jù)2019年新國(guó)標(biāo)GB31660.5-2019《動(dòng)物性食品中金剛烷胺殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》，使用CNW PSA SPE小柱進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，此方法耗材簡(jiǎn)單易得，回收率高，重現(xiàn)性好。

一、樣品前處理

1.豬肉基質(zhì)： 

稱取均質(zhì)處理的豬肉樣品2g于50mL離心管中，加入 D15-金剛烷胺內(nèi)標(biāo)溶液（加標(biāo)濃度20ppb，豬肉基質(zhì)空白樣品則不需要加標(biāo)），加1%乙酸乙腈溶液10mL，漩渦2min，3000 r/min離心5min，上清液轉(zhuǎn)入另一50mL離心管中，重復(fù)提取一次，合并兩次上清液。在合并的上清液中加無(wú)水硫酸鈉3g、正己烷10mL，渦旋1min，3000r/min離心5min，棄去正己烷層，剩余溶液轉(zhuǎn)至100mL雞心瓶中，40℃水浴下旋轉(zhuǎn)蒸干，用1.0 mL甲醇溶解殘?jiān)?/p>

2.雞肝基質(zhì)：

稱取均質(zhì)處理的雞肝樣品2g于50mL離心管中，加入 D15-金剛烷胺內(nèi)標(biāo)溶液（加標(biāo)濃度20ppb，雞肝基質(zhì)空白則不需要加內(nèi)標(biāo)），加1%乙酸乙腈溶液10mL，漩渦2min，3000r/min 離心5min，上清液轉(zhuǎn)入另一50mL 離心管中，重復(fù)提取一次，合并兩次上清液。在合并的上清液中加無(wú)水硫酸鈉3g、正己烷10mL，渦旋1min，3000r/min離心5min，棄去正己烷層，剩余溶液轉(zhuǎn)至100mL雞心瓶中，40℃水浴下旋轉(zhuǎn)蒸干，用1.0mL甲醇溶解殘?jiān)?/p>

二、小柱操作

SBEQ-CA2450  CNWBOND PSA 乙二胺基-N-丙基 SPE小柱 50mg， 1mL/100 pcs

凈化：將溶解液直接勻速通過小柱，呈滴狀流入試管中。

濃縮：量取濾液0.5 mL于離心管中，40℃氮?dú)獯蹈?，加?0%乙腈水溶液0.5 mL，渦旋30s，10000 r/min離心5 min，取上清液過0.22 μm針式濾器供上機(jī)測(cè)定

三、LCMS/MS測(cè)定條件

液相條件: 

色譜柱：Athena C18（2.1*50mm，1.8um）

流速：0.2 mL/min

柱溫：40℃

進(jìn)樣量：1ul

流動(dòng)相:  A: 0.1%甲酸水   B: 甲醇  

質(zhì)譜參數(shù):  

離子源：ESI

采集模式：正模式

掃描方式：MRM      

離子源溫度：300℃

電壓：4000V

金剛烷胺離子對(duì)：152_135（定性定量） 152_93（定性）

鹽酸金剛烷胺-D15離子對(duì)：167_150（定性定量）

四、實(shí)驗(yàn)譜圖

1.金剛烷胺標(biāo)品圖譜20ppb

2.豬肉基質(zhì)加標(biāo)譜圖（20ppb）

3.豬肉基質(zhì)空白譜圖

4.雞肝基質(zhì)加標(biāo)20ppb

 5.雞肝基質(zhì)空白

五、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

采用基質(zhì)配標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制標(biāo)準(zhǔn)曲線，本次實(shí)驗(yàn)豬肉基質(zhì)空白中檢出金剛烷胺1.1ug/kg，雞肝基質(zhì)空白中檢出金剛烷胺0.3ug/kg 。

六、實(shí)驗(yàn)耗材